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职业药师考前培训

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相关知识点

执业药师考试药物分析复习要点第六章色谱法

色谱法是一种物理或物理化学分离分析方法。先将混合物中各组分分离而后逐个分析,是分析混合物最有力的手段。具有高灵敏度、高选择性、高效能、分析速度快、应用范围广等优点(环球网校分享2017年执业药师考试药物分析复习要点第六章色谱法)。

色谱过程是物质分子在相对运动的两相(固定相和流动相)间分配平衡的过程,可用分配系数K和容量因子k描述。

例题:色谱过程使物质分子在; A.溶液中达到平衡的过程B. 两相中平衡的过程C. 固定相中分配的过程 D. 流动相中溶解的过程

E. 相对运动的两相(流动相与固定相)间分配平衡的过程 答案: E

1.分配系数K=Cs/Cm,与组分、固定相和流动相性质和温度有关。

2.容量因子k=Ws/Wm,不仅与组分、固定相和流动相性质和温度有关,还与两相体积有关。容量因子不等是色谱分离的先决条件。

3.色谱过程方程:保留时间与分配系数关系tR=t0(1 k)

第一节 薄层色谱法

掌握薄层色谱法的基本原理、操作方法以及在药物鉴别、检查中的应用。

一、基本原理

1.吸附薄层色谱:吸附剂对不同组分A和B具有不同吸附能力,展开剂也对A和B有不同溶解、解吸能力,当展开剂不断展开, A、B在吸附剂和展开剂之间连续不断吸附解吸,产生差速迁移得到分离。

2.比移值:Rf=l/l0,为组分迁移距离与展开剂迁移距离之比

比移值的最佳范围是0.3~0.5,可用范围是0.2~0.8。

影响比移值因素:①被分离物质的结构和性质。极性较强的组分Rf较小。②薄层板性质。吸附剂活性越强,吸附作用就越强,Rf越小。③展开剂性质。极性越强展开剂Rf值增大④展开剂蒸气饱和度对Rf也有较大影响。

3.分离度:R=2d/(W1 W2),两相邻斑点中心距离与两斑点平均宽度的比值

二、操作方法

1.吸附剂和展开剂的选择

(1)吸附剂:常用有硅胶、氧化铝、聚酰胺、硅藻土等。硅胶、氧化铝的活性与含水量有关,含水量高,活性低,吸附力弱;聚酰胺表面的酰胺基可形成氢键,选择性高。

(2)展开剂:极性较强的展开剂适用于极性较强组分的洗脱;极性较弱的展开剂适用于极性较弱组分的洗脱。加入少量酸、碱可以使极性物质斑点集中,减少拖尾,提高分离度。

选择一般原则是,分离极性较强组分时选用活性低的薄层板,以极性强的展开剂展开。分离弱极性组分时,宜选用活性高的薄层板,以极性弱的展开剂展开。调整待测组分Rf0.3~0.5范围内。

2.薄层板制备:1份固定相与3份水混和涂布,110℃烘30分钟。

3.点样与展开:点样一般为直径2~4mm圆点,距底2.0cm;展开距离一般为10~15cm。

4.斑点定位:有色可直接观察;有荧光在紫外灯下观察;喷洒显色剂使组分显色。

三、应用 1.鉴别:比较供试品与对照品溶液的比移值 2.杂质检查:杂质对照品比较法;高低浓度对比法

第二节 气相色谱法和高效液相色谱法

掌握气相色谱法和高效液相色谱法的基本原理;色谱系统适用性试验的主要内容;气相色谱法和高效液相色谱法在药物鉴别、检查和含量测定中的应用。了解气相色谱仪和高效液相色谱仪的基本结构。

一、气相色谱法: 以气体为流动相的色谱法,具有分离效能高、灵敏度高、样品用量少、分析速度快等优点,不适用于难挥发和热稳定性差的物质分析。

(一)基本原理

1.基本概念

色谱峰参数:峰高或峰面积(用于定量),峰位(保留值表示,用于定性),峰宽(用于衡量柱效)

保留值:保留时间、死时间、调整保留时间

峰宽:标准差、半峰宽、峰宽

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